EHV1-EHV4 PCR

La PCR EHV-1 / EHV-4 permet de détecter directement le matériel génétique des herpesvirus équins dans les prélèvements respiratoires, sanguins, LCR et organes

Contrairement à la sérologie, qui détecte une réponse immunitaire, la PCR met en évidence la présence du virus lui-même.

Elle constitue aujourd’hui la méthode de référence pour confirmer une infection active par EHV-1 ou EHV-4.

Peut provoquer :

• Des formes respiratoires,
• Des avortements,
• Une mortalité néonatale,
• Des formes neurologiques (EHM : Equine Herpes Myeloencephalopathy).
• Des atteintes oculaires

EHV-1 est le virus le plus préoccupant sur le plan sanitaire et réglementaire lors des rassemblements de chevaux

Principalement associé :

• Aux formes respiratoires,
• Surtout chez les jeunes chevaux.
• Avortements sporadiques

Les signes cliniques les plus fréquents sont :

• Hyperthermie, abattement et anorexie
• Jetage nasal,
• Toux (moins fréquente que pour la grippe)
• Baisse de performance.

Certains chevaux excréteurs peuvent présenter très peu de signes cliniques.

Signes possibles :

• Ataxie,
• Faiblesse des postérieurs,
• Troubles urinaires,
• Difficultés à se relever,
• Décubitus.

Toute hyperthermie associée à des signes neurologiques doit faire suspecter EHV-1.

Suspicion devant :

• Avortement brutal,
• Multiples avortements dans l’effectif
• Mortalité néonatale,

Le virus se transmet principalement par :

• Aérosols,
• Contact rapproché,
• Les sécrétions respiratoires,
• Le matériel contaminé,
• Les avortons et placentas,
• Les personnes circulant entre chevaux ainsi que les animaux domestiques circulant dans l’écurie (chiens, chats)

Les chevaux peuvent excréter le virus avant l’apparition des signes cliniques.

Après infection respiratoire :

• Le virus se multiplie dans l’épithélium respiratoire,
• Puis peut diffuser via une virémie cellulaire.

Chez certains chevaux, EHV-1 peut provoquer :

• Une atteinte vasculaire,
• Des thromboses,
• Des lésions neurologiques,
• Des avortements.

Les herpès virus équins possèdent également une capacité de latence : un cheval infecté peut rester porteur latent à vie.

Le stress, les transports, les compétitions ou les maladies concomitantes peuvent favoriser une réactivation virale.

La PCR EHV-1 / EHV-4 permet de :

• Confirmer une infection active,
• Détecter précocement un foyer,
• Identifier les chevaux excréteurs,
• Aider à la gestion des rassemblements et compétitions,
• Orienter les mesures de biosécurité,
• Investiguer des cas neurologiques ou des avortements.

Forme respiratoire

• Écouvillon nasopharyngé (ENP),
• Sang EDTA.
• Associer ENP + sang permet d’augmente la sensibilité diagnostique.

 Forme neurologique

• ENP,
• Sang EDTA,
• Éventuellement liquide céphalorachidien (LCR) selon le contexte.

Avortement

• Placenta,
• Foie, poumon et rate du fœtus,
• Liquides biologiques.

PCR positive

Compatible avec :

• Infection active,
• Excrétion virale,
• Virémie.

Un cheval PCR positif doit être considéré comme contagieux.

PCR négative

Compatible avec :

• Absence d’infection active,
• Prélèvement trop précoce ou trop tardif,
• Prélèvement de qualité insuffisante.
• Excrétion très faible ou intermittente (rare)

Une PCR négative n’exclut pas totalement une infection à EHV selon le contexte clinique.

Lors d’une PCR en temps réel, le Ct (Cycle threshold) correspond au nombre de cycles nécessaires pour détecter le matériel génétique viral. Plus le Ct est faible, plus la quantité de virus présente dans le prélèvement est importante.

À titre indicatif :

• Ct < 25 : forte charge virale, compatible avec une excrétion importante ou une virémie marquée.
• Ct entre 25 et 35 : charge virale intermédiaire.
• Ct > 35 : faible quantité d’ADN viral détectée, compatible avec un début ou une fin d’infection, une excrétion faible ou un prélèvement peu riche en matériel viral.

La valeur du Ct ne doit jamais être interprétée isolément. Elle dépend notamment :

• du type de prélèvement (écouvillon nasopharyngé, sang, LCR, tissus…) ;
• de la qualité du prélèvement ;
• du moment du prélèvement par rapport au début de l’infection ;
• de la méthode PCR utilisée.

Un cheval présentant un Ct faible sur écouvillon nasopharyngé est généralement plus susceptible d’excréter de grandes quantités de virus qu’un cheval présentant un Ct élevé, mais le Ct ne permet pas, à lui seul, de prédire le risque de transmission ni la survenue d’une forme neurologique (EHM).

La PCR répond à la question : “Le cheval excrète-t-il actuellement du virus ?”

La sérologie répond à : “Le cheval a-t-il été exposé au virus ?”

En phase aiguë, la PCR est l’examen prioritaire.

En cas de suspicion :

• Isolement immédiat du cheval et des chevaux ayant été en contact direct avec lui
• Arrêt des mouvements au sein de la structure
• Prise de température bi-quotidienne,
• Séparation stricte des groupes,
• Nettoyage et désinfection rigoureuse du matériel, des locaux, …
• Gestion spécifique des contacts,
• Limitation des rassemblements.

Les herpesvirus équins sont très contagieux dans les collectivités.

Les épisodes d’EHV-1 neurologique ont un impact majeur :

• Sanitaire,
• Sportif,
• Économique,
• Et réglementaire.

La détection précoce est essentielle pour limiter la diffusion lors des concours, centres d’entraînement et rassemblements.

LABÉO réalise :

• PCR EHV-1,
• PCR EHV-4,
• Panels PCR respiratoires équins,
• Analyses sur avortons et placenta, autres tissus et LCR
• Recherche du virus dans l’environnement (surfaces, eau, etc…)
• Accompagnement technique et interprétation vétérinaire.

Lunn DP, Davis-Poynter N, Flaminio MJ, Horohov DW, Osterrieder K, Pusterla N, Townsend HG. Equine herpesvirus-1 consensus statement. J Vet Intern Med. 2009 May-Jun;23(3):450-61. doi: 10.1111/j.1939-1676.2009.0304.x. PMID: 19645832.

Paillot R, Sutton G, Thieulent C, Marcillaud-Pitel C, Pronost S. New EHV-1 variant identified. Vet Rec. 2020 May 30;186(17):573. doi: 10.1136/vr.m1441. Epub 2020 May 25. PMID: 32451347.

Pusterla N, Hussey GS, Goehring LS. Equine Herpesvirus-1 Myeloencephalopathy. Vet Clin North Am Equine Pract. 2022 Aug;38(2):339-362. doi: 10.1016/j.cveq.2022.05.006. Epub 2022 Jul 7. PMID: 35811201.