Grippe équine sérologie

La sérologie grippe équine permet de détecter les anticorps dirigés contre les virus influenza équins, principalement les virus influenza A H3N8.

Elle permet :
• D’évaluer le niveau d’immunité humorale,
• De suivre la réponse vaccinale,
• D’objectiver une circulation virale récente,
• D’évaluer le niveau de protection d’un cheval ou d’un effectif.

La sérologie détecte une réponse immunitaire et non la présence directe du virus.

Trois principales techniques sérologiques peuvent être utilisées :

• La RFC (Réaction de Fixation du Complément),
• L’ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay),
• La SRH (Single Radial Hemolysis).

La RFC est une technique historique principalement utilisée pour rechercher une infection récente.

La RFC détecte des anticorps capables de fixer le complément en présence d’antigènes viraux.
Les anticorps détectés apparaissent rapidement après infection mais persistent relativement peu longtemps.

• Mise en évidence d’une infection récente,
• Utile lors d’investigation de foyers respiratoires.

• Sensibilité limitée,
• Persistance courte des anticorps,
• Peu informative sur le niveau réel de protection immunitaire,
• Peu adaptée au suivi vaccinal.

Technique aujourd’hui beaucoup moins utilisée en routine.

L’ELISA est une méthode sérologique principalement utilisée comme outil de suivi épidémiologique et de surveillance d’un passage infectieux.

Les puits d’une plaque sont sensibilisés avec la nucléoprotéine (NP) du virus Influenza A. L’ELISA permet de détecter les anticorps dirigés contre cette protéine virale dans le sérum. En présence de ces anticorps, une réaction enzymatique se produit et est mesurée par spectrophotométrie.

L’approche DIVA (Differentiating Infected from Vaccinated Animals) permet de différencier les animaux infectés naturellement de ceux vaccinés avec un vaccin recombinant ne contenant pas la nucléoprotéine. Ce test constitue ainsi un outil précieux pour la surveillance sanitaire et les enquêtes épidémiologiques en complément des autres méthodes de diagnostic de la grippe équine.

• Technique rapide,
• Automatisable,
• Adaptée au dépistage de grands effectifs.

• Pas d’indication sur la protection immunitaire
•  La différenciation des anticorps vaccinaux ne peut se faire que si le cheval est vacciné avec un vaccin recombinant.

La SRH est aujourd’hui la méthode de référence internationale pour l’évaluation de l’immunité contre la grippe équine.

La technique de SRH repose sur la diffusion des anticorps présents dans le sérum à travers un gel contenant des antigènes du virus de la grippe équine, des globules rouges sensibilisés et du complément. Lorsque des anticorps spécifiques sont présents ils provoquent l’apparition d’une zone d’hémolyse proportionnelle au niveau d’anticorps protecteurs.

La surface mesurée reflète le niveau d’anticorps fonctionnels dirigés contre la grippe équine.

• Excellente corrélation avec la protection immunitaire,
• Méthode de référence internationale (recommandée par l’OMSA),
• Très utilisée dans les études vaccinales et en médecine sportive équine,
• Permet une évaluation quantitative de l’immunité.

• Technique spécialisée,
• Réalisée dans peu de laboratoires,
• Délai analytique plus long.

LABÉO propose la technique SRH, méthode de référence internationale pour l’évaluation de l’immunité grippale équine.

La grippe équine est une maladie respiratoire extrêmement contagieuse pouvant circuler rapidement dans les effectifs équins.

Les signes cliniques les plus fréquents sont :
• Hyperthermie brutale avec abattement et anorexie
• Toux sèche,
• Jetage séreux puis mucopurulent,
• Baisse de performance.

Les jeunes chevaux, chevaux de sport et chevaux en déplacement fréquent sont particulièrement exposés.

Le virus se transmet principalement :

• Par aérosols,
• Par contact rapproché entre chevaux,
• Via le matériel ou les personnes contaminées,
• Lors des rassemblements, transports et compétitions.

La diffusion dans un effectif naïf peut être extrêmement rapide.

Les virus influenza équins infectent l’épithélium respiratoire et provoquent :

• Une destruction des cellules ciliées,
• Une altération de la clairance mucociliaire,

Cette atteinte favorise secondairement les surinfections bactériennes respiratoires.

La sérologie grippe équine permet :

• Le suivi vaccinal,
• L’évaluation du niveau de protection d’un effectif,
• L’identification des chevaux insuffisamment protégés,
• L’investigation d’un foyer respiratoire,
• L’étude de la circulation virale.

Une sérologie positive ne signifie pas nécessairement une infection récente : la vaccination induit également des anticorps détectables.

Une augmentation significative du titre sur deux prélèvements successifs est compatible avec une infection récente.

Permet principalement un dépistage sérologique. ELISA DIVA permettant de distinguer les anticorps vaccinaux (vaccin recombinant) des anticorps dus à une infection naturelle.

• < 85 mm² : protection insuffisante
• 85–150 mm² : protection clinique
• > 150 mm² : protection virologique

Les résultats des différents tests doivent être interprétés selon :

• L’âge,
• Le statut vaccinal,
• Le risque d’exposition,
• Le contexte clinique.

En cas de suspicion clinique :

• Réaliser un premier prélèvement,
• Puis un second 15 jours plus tard.

Une augmentation significative des titres d’anticorps est fortement évocatrice d’une infection récente.

La PCR détecte directement le virus et répond à la question : “Le cheval excrète-t-il actuellement le virus ?”
La sérologie détecte les anticorps et répond à la question : “Le cheval a-t-il été exposé au virus ou vacciné, et quel est son niveau d’immunité ou de protection immunitaire ?”
En cas de suspicion d’infection récente, la PCR est l’examen prioritaire.
La sérologie peut compléter l’investigation, notamment sur deux prélèvements successifs, pour documenter une séroconversion.

Recommandations pratiques :

• Surveillance quotidienne de la température,
• Isolement rapide des chevaux fébriles,
• Limitation des mouvements,
• Contrôle des introductions,
• Vaccination adaptée au niveau de risque,
• Gestion rigoureuse des rassemblements et transports.

• Sérologie grippe équine par SRH, ELISA et RFC,
• PCR grippe équine,
• Gestion de foyer,
• Accompagnement technique et interprétation vétérinaire.

LABÉO fait partie des rares laboratoires français proposant la technique SRH pour l’évaluation de l’immunité grippale équine.